Fast and reliable production, purification and characterization of heat-stable, bifunctional enzyme chimeras

Mara Neddersen & Skander Elleuche
Der Abbau von komplexer Biomasse benötigt ein abgestimmtes Portfolio and Glykosidhydrolasen. Die LE-Klonierungsstrategie wurde dazu genutzt die beiden Cellulasen Cel5A (C) und Bgl1 (B) in zwei verschiedenen Reihenfolgen (CB und BC) zu verknüpfen und in rekombinanter Form in Escherichia coli zu produzieren. Die vollständige Reinigung der Enzymchimären und ihre Charakterisierung ergab, dass die katalytische Funktionalität beider Proteine durch die Reihenfolge der Fusion und damit verbunden durch die Konfirmation und Faltung beeinflusst wurde. Nichtsdestotrotz konnten verbesserte...
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